El dióxido de carbono (CO2) presente en la muestra consume, según las reacciones acopladas descritas a continuación, cofactor análogo de NADH que puede ser medido por espectrofotometría a 405nm
 
Fosfoenolpiruvato + HCO3 ------------Oxaloacetato + H2PO4 -
Oxaloacetato + análogo NADH-----Malato + análogo NAD+