El colesterol de las proteínas de baja densidad (LDL), las de muy baja densidad (VLDL) y los quilomicrones es hidrolizado por la colesterol oxidasa mediante una reacción enzimática acelerada no formadora de color. El detergente presente en el reactivo B solubiliza el colesterol de las lipoproteínas de alta densidad (HDL) de la muestra. El colesterol de HDL se cuantifica espectrofotométricamente mediante las reacciones acopladas descritas a continuación:
 
Colesterol esterificado + H2O------------------Colesterol + Ácido graso
Colesterol + ½ O2 + H2O------------------------Colestenona + H2O2
2 H2O2 + 4-Aminoantipirina + DSBmT--------------------Quinonaimina + 4 H2O